دینامیک میان کنش اسپرم گوسفند با پلاسمید حاوی ژن لیزوزیم انسانی در انتقال ژن به واسطه اسپرم

author

  • خسرو حسینی پژوه، پرویز تاجیک ، مرتضی کریمی پور .
Abstract:

مطالعات قابلیت اسپرم برای انتقال ژن خارجی به تخم را ثابت کرده است. گزارش‌های مربوط به اثرات زمان گرمخانه­گذاری و میزان DNA بر میزان جذب و پارامترهای اسپرم متفاوت و گاه متناقض بوده است. هدف از این مطالعه بررسی اثر زمان گرمخانه­گذاری اسپرم گوسفند با DNA خارجی و مقدار این DNA بر سرعت، میزان جذب و تحرک اسپرم و مقایسه اسپرم انزالی و اپیدیدیمی از این نظر بود. برای این منظور اسپرم انزالی (4N=) و اپیدیدیمی (6N=) با مدت‌زمان متفاوت(15 تا 90 دقیقه) و مقادیر متفاوت با پلاسمید pEGFPN حامل ژن لیزوزیم انسانی(5 تا 500 نانوگرم/106 اسپرم/25 میکرولیتر) گرمخانه­گذاری شده و میزان ورود پلاسمید به اسپرم و تحرک اسپرم‌ها ارزیابی گردید.  نتایج نشان داد که  تا  متوسط 33/65 درصد اسپرم‌ها توانستند  پلاسمید حاوی ژن لیزوزیم انسانی را جذب کنند. افزایش میزان DNA خارجی و زمان انکوباسیون به‌خصوص تا 60 دقیقه باعث افزایش مقدار DNA جذب‌شده توسط اسپرم و افزایش اسپرم‌های حاوی DNA خارجی ‌شد اگرچه بیشترین سرعت جذب در 15 دقیقه اول رخ داد. به نظر می‌رسد  هرچه مقدار DNA خارجی بیشتر باشد سرعت جذب بیشتر و زمان رسیدن به حداکثر تعداد اسپرم‌های دارای جذب کوتاه‌تر باشد. کاهش اندکی در تحرک تام و پیش‌رونده اسپرم‌های گروه تیمار با گروه شاهد به‌استثنای 5 دقیقه انکوباسیون مشاهده شد. هیچ اسپرم متحرکی که دارای جذب DNA در ناحیه پشت آکروزوم باشد مشاهده نشد. به نظر می‌رسد گرمخانه‌گذاری اسپرم با مقادیر متوسط(20تا200 نانوگرم) DNA خارجی بیش از 30 دقیقه و در مقادیر کم(5 نانوگرم) بیش از 60 دقیقه لازم نباشد.

Upgrade to premium to download articles

Sign up to access the full text

Already have an account?login

similar resources

ترانسفکشن اسپرم انزالی گوسفند با پلاسمید حاوی ژن لیزوزیم انسانی

زمینه مطالعه: ‌انتقال ژن بواسطه اسپرم به عنوان یک روش ساده و ارزان برای تولید جانوران تراریخته مطرح شده است. هدف:‌ ‌هدف از این تحقیق بررسی جذب پلاسمید حاوی ژن لیزوزیم انسانی توسط اسپرم انزالی گوسفند و اثر زمان انکوباسیون و حضور مایع منی در میزان و شدت جذب این پلاسمید و تحرک اسپرم‌ها بود. روش کار:‌ ‌در آزمایش اول از 3 قوچ و 2 بار از هر قوچ، به روش الکتریکی اسپرم تهیه شده و پس از شستشو و حذف مایع...

full text

ترانسفکشن اسپرم انزالی گوسفند با پلاسمید حاوی ژن لیزوزیم انسانی

زمینه مطالعه: انتقال ژن بواسطه اسپرم به عنوان یک روش ساده و ارزان برای تولید جانوران تراریخته مطرح شده است. هدف: هدف از این تحقیق بررسی جذب پلاسمید حاوی ژن لیزوزیم انسانی توسط اسپرم انزالی گوسفند و اثر زمان انکوباسیون و حضور مایع منی در میزان و شدت جذب این پلاسمید و تحرک اسپرم ها بود. روش کار: در آزمایش اول از 3 قوچ و 2 بار از هر قوچ، به روش الکتریکی اسپرم تهیه شده و پس از شستشو و حذف مایع منی،...

full text

همسانه‌سازی ژن زیرواحد بتا هورمون گونادوتروپین جفت انسانی در پی انتقال ژن به اسپرم خروس

هدف از این مطالعه، همسانه‌سازی‌زیرواحد بتای هورمون گونادوتروپین جفت انسانی در ناقل‌ مناسب بود که بتواند از طریق اسپرم در تولید طیور تراریخت به کار گرفته شود. به این منظور زیرواحد بتای این هورمون به کمک یک جفت آغازگر اختصاصی تکثیر و درناقل T همسانه‌سازی شد. فرآیند ترانسفورماسیون پلاسمید نوترکیب در سلول‌های مستعد اشریشیاکلی انجام گرفت و کلونی‌های دارای پلاسمید نوترکیب به‌وسیله PCR انتخاب شدند. صح...

full text

تکنیک انتقال ژن از طریق اسپرم

حیوانات تراریخت امکان و فرصت های مناسبی در راستای تولید فرآورده های نوترکیب فراهم کرده اند. سال های متمادی تکنیک های مختلفی جهت تولید هر چه بهتر این موجودات استفاده شده است. اما از جدیدترین این تکنیک ها می توان smgt را نام برد که بر مبنای توانایی سلول های اسپرم در جذب dna و انتقال آن به اووسیت در زمان لقاح پایه ریزی شده است. هنوز مکانیسم عملکرد smgt به خوبی مشخص نشده است، اما به نظر می رسد که و...

full text

بهینه کردن انتقال ژن به واسطه اگروباکتریوم در گیاه دارویی زنیان با استفاده از ژن fld

به منظور بهینه کردن شرایط انتقال ژن به گیاه دارویی زنیان عوامل مختلف شامل رقت آگروباکتریوم، سویه آگروباکتریوم، نوع آنتی بیوتیک کشنده آگروباکتریوم، غلظت استوسرینگون و مدت زمان تلقیح بر روی تعداد گیاهان باززا شده با استفاده ازسازه ژنی p6U-Ubi-FVT دارای ژن انتخابیHPT و ژن fld بررسی شد. غلظت 20 میلی گرم در لیتر هیگرومایسین برای غربالگری سلول های تراریخت و جلوگیری از تولید کالوس در سلول های غیر ترار...

full text

My Resources

Save resource for easier access later

Save to my library Already added to my library

{@ msg_add @}


Journal title

volume 11  issue شماره 3(پیاپی 46 )

pages  1331- 1344

publication date 2015-01-21

By following a journal you will be notified via email when a new issue of this journal is published.

Hosted on Doprax cloud platform doprax.com

copyright © 2015-2023